大鼠Klotho蛋白(Klotho)ELISA试剂盒实验使用说明书

　　大鼠Klotho蛋白(Klotho)ELISA试剂盒实验使用说明书

　　BS-3658   天津本生大鼠Klotho蛋白(Klotho)ELISA试剂盒

　　大鼠Klotho蛋白(Klotho)ELISA试剂盒的实验使用说明书主要包括以下内容：

　　1. ‌实验原理‌

　　该试剂盒采用双抗体夹心法测定标本中大鼠Klotho蛋白(Klotho)水平。通过纯化的大鼠Klotho蛋白抗体包被微孔板，形成固相抗体，依次加入Klotho蛋白和HRP标记的Klotho蛋白抗体，形成抗体-抗原-酶标抗体复合物。经过洗涤后，加入底物TMB显色，颜色深浅与样品中Klotho蛋白含量呈正相关。最后用酶标仪在450nm波长下测定吸光度(OD值)，通过标准曲线计算样品浓度‌。

　　2. ‌试剂盒组成‌

　　30倍浓缩洗涤液：20ml×1瓶

　　酶标试剂：6ml×1瓶

　　标准品：2瓶

　　稀释液：1×45mL

　　检测溶液A：1×120μL

　　检测溶液B：1×120μL

　　TMB底物：1×9mL

　　终止液：1×6mL

　　96孔板(预包被)：1块

　　96孔板覆膜：2张

　　使用说明书：1份‌。

　　3. ‌样本处理及要求‌

　　血清‌：全血标本在室温放置2小时或4℃过夜，1000×g离心20分钟，取上清，避免反复冻融‌。

　　血浆‌：使用EDTA或肝素抗凝，采集后30分钟内于2-8℃离心，取上清‌。

　　细胞上清液‌：3000转离心10分钟去除颗粒‌。

　　组织匀浆‌：将组织加入适量生理盐水捣碎，离心后取上清‌。

　　4. ‌实验步骤‌

　　加样：标准品及样本各50μL，37℃孵育30分钟‌。

　　洗涤：洗板5次，加入酶标试剂50μL，37℃孵育30分钟‌。

　　显色：加入显色液A、B各50μL，37℃孵育15分钟‌。

　　终止：加入终止液50μL，立即用酶标仪在450nm波长下测定吸光度‌。

　　5. ‌注意事项‌

　　试剂盒需在2-8℃保存，开封后酶标板需密封保存于-20℃‌。

　　实验过程中需避免样本反复冻融，确保操作环境温度、湿度一致‌。

　　试剂盒有效期一般为6个月至12个月，具体以标签为准‌。

　　6. ‌适用范围‌

　　该试剂盒适用于体外定量检测大鼠血清、血浆、组织匀浆及相关液体样本中Klotho蛋白的含量‌。

　　以上内容综合了多个来源的实验使用说明书，确保实验操作的准确性和可靠性‌。