关于超滤管的常见问题与解答
Q:超滤管的膜材质是什么?
A:超滤管的膜材质为密理博的Ultracel再生纤维素膜,生产工艺严格,截留分子量明确而准, 蛋白吸附损失小。
Q:如果要用超滤的方法分离两种蛋白,那么这两个蛋白的大小需要相差多少?
A:按照经验,建议两个蛋白的分子量要相差 一个数量级(10倍)。
Q:超滤管可以用酒精消毒灭菌么?
A: 超滤管与70%乙醇是兼容的,但是对灭菌处理的具体方法没有做相关的测试,所以无法提供更进一步的参考信息。
Q:超滤装置是否可以用于高压灭菌?
A: 超滤管都是采用热封设计,不可以用高压高温灭菌。
Q:蛋白在浓缩时出现了沉淀,如何改进?
A:蛋白如果浓缩过快或者过度浓缩都有可能引起蛋白沉淀。建议蛋白浓缩后的 浓度不超过20mg/ml.对于对浓缩速度敏感而容易沉淀的蛋白,建议的改进方法是:
1)离心力降为推荐离心力的30%-50%
2)改用截留分子量大的超滤管(如原本选用10k,此时可以选择30k)
3)在浓缩过程中取出超滤管, 用吸头反复吹吸几次后再继续浓缩
Q:浓缩后发现浓缩液中没有目的蛋白,可能的原因有哪些?
A:首先,超滤管的蛋白起始浓度为25ug/ml.请确保样本的起始浓度大于这个浓度。其次,如果问题仍然出现,请不要丢弃样本滤过液以便用于分析可能的原因:
1)如果目的样本在滤过液中,那么请排查: .
a)是否选择了合适截留分子量的超滤管(目的蛋白分子量的1/2或者1/3)?
b)使用的离心力是否是在限定范围内?如果使用的是rpm,请换算成相应的g离心力,具体换算方
法请垂询。
c) 离心机最近是否有校准过?
Q:有时候用超滤离心管连水都离不下来,可能是什么原因?
A:超滤膜中含有微量甘油。如果出现这种情况,请先用0.1 N NaOH清洗再离心。最后用缓冲液或Milli-Q@水再次清洗后甩干。清洗后的滤膜应立即使用,如暂时不用,请保持润湿状态,避免重新干燥。
注意事项
为了您的安全和健康,请穿实验服并戴一次性手套操作。
本试剂仅供实验室研究使用
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