从样本到结果：非洲猪瘟核酸检测仪工作原理解析@2024全国包邮JD-PCR08,山东竞道厂家介绍,非洲猪瘟(African Swine Fever, ASF)核酸检测仪主要利用聚合酶链式反应(PCR)技术对样本中的病毒DNA进行检测。以下是从样本到结果的工作原理解析：

1.样本准备

样本采集与处理：

采集：从猪只的血液、粪便或组织中采集样本,确保样本代表性和有效性。

处理：对样本进行预处理,如离心、过滤和裂解,以提取病毒DNA。通常采用专用的样品处理设备,确保样品中的DNA被有效释放和纯化。

2.DNA提取

提取过程：

裂解样本：使用裂解缓冲液破坏样本中的细胞膜,释放DNA。

纯化：通过离心和柱纯化技术去除蛋白质和其他杂质,只保留纯净的DNA样本。这一步骤通常在专用的自动化提取设备中进行,保证高效和一致性。

3.PCR扩增

PCR反应体系：

引物和探针：在PCR反应中,设计特异性引物和探针,这些引物与目标病毒的DNA序列互补,确保特异性扩增非洲猪瘟病毒的特定基因片段。

扩增反应：将提取的DNA与引物、探针和PCR反应混合液放入PCR仪中。PCR仪通过循环加热(变性)、降温(退火)和中温(延伸)三个阶段,重复多次,使目标DNA片段在每个循环中都进行指数级扩增。

4.实时监测

实时PCR(qPCR)：

荧光标记：使用荧光染料或探针,结合在扩增的DNA片段上。当PCR反应进行时,荧光信号会随扩增产物的增加而增强。

数据收集：PCR仪实时监测荧光信号的变化,通过荧光信号强度判断DNA的量。软件将这些数据转换为定量结果,并生成实时的扩增曲线。

5.结果分析

数据处理：

阈值设置：根据荧光信号的变化,设定一个阈值,以区分阳性和阴性结果。阳性结果表示样本中含有非洲猪瘟病毒的DNA。

结果报告：软件生成检测结果报告,包括样本是否为阳性、病毒负荷量及其他相关数据。报告会提供清晰的结果解释和建议措施。

总结

非洲猪瘟核酸检测仪利用PCR技术通过样本准备、DNA提取、扩增、实时监测和结果分析的过程,能够准确检测样本中是否含有非洲猪瘟病毒。实时PCR的高灵敏度和特异性使得该技术在早期检测和快速诊断中具有重要作用。