知识讲解:ELISA实验设置阴性、阳性和空白对照的重要作用
ELISA检测,要求严格按照试剂说明书要求,每次试验、每块扳上都要设置以下3项对照和用途下面我司技术为您详细介绍ELISA实验设置阴性、阳性和空白对照的作用:
1.空白对照:仅用稀释液代替检测样本、用以观测zui终反应的显色"本底"、并用于酶标仪消除、扣除"本底",即:以本底为"零"读取阳性、阴性对照孔和样本检测孔的吸光值(A);或者,在计算阴性对照均值(NCx)、阳性对照均值(PCx)、样本读数的S/C.O.值时减去空白对照的本底吸光值。
2.阴性对照(品):所谓阴性对照(品),应当是本项检测试验中采用与待捡物(样品、人用试剂就是人的血清等)具有同源性和同质性,又不含有待检物质,并能客观比较和鉴别处理因素(血清免疫学试验中有特异性抗原与抗体反应)之间的差异。
3.阳性对照(品):
(1)阳性对照(品)的概念与要求:同阴性对照(品),只是采用"精选"的含有待检物质的人血清制备而成。所谓"精选",就是把收集的阳性人血清经过数种试验进行"筛试"、把含有"干扰性物质"的血清剔除、不用,以避免出现"假阳性"干扰试验结果。
(2)阳性对照(品)设置,也可区分为两种类型与用途:
一是阳性对照主要用于评价该项试验结果是否有效和试验结果的稳定性与可比性。而所设的阳性对照的测量值不列入Cut off值计算、但是不可不做。如HBsAg、抗—HBs、HBeAg等。
二是阳性对照的设置,不仅用于评价试验结果是否有效和试验结果的稳定性与可比性,而且计入Cut off的计算。此时的Cut off值的含义是代表该标志物在健康(正常)人群中正常值范围的上限。待检样本检测值超过该上限(Cut off)时表示有诊断意义。
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