AVT团队向您推荐一种操作简便且复现性较好的缓冲液配制方法：使用氨丁三醇（Tris）及盐酸氨丁三醇（Tris-HCl）固体粉末进行配制。

使用时,可根据目标浓度及pH,计算并直接称取两种固体粉末混合,溶解定容,至于两种固体粉末的用量如何确认,您可以参考以下实验步骤以及艾伟拓实验室实测值,通过一个简单的预实验进行确认：

1.分别配制目标浓度的Tris与Tris-HCl（这里以0.1mol/L为例）

2.两种溶液分别取不同体积混合成相同体积（这里以100mL为例）的缓冲液,测定溶液pH

待摸索出两种溶液适宜比例后,根据计划配置的缓冲液体积,倒算两种固体粉末的用量。

基于该方法,我们复现了Moderna的xinguanmRNA疫苗中的Tris缓冲溶液,pH理论值为7~8,实测值为7.47（注：该实测值为溶液中only包含Tris/Tris-HCl,不含mRNA-LNP及其他辅料情况下的pH值）。

该方法的优势是操作简便,只需称取及溶解两步,在外界温度及溶液浓度相同的情况下,复现性较好,且无需使用浓盐酸等严格受限的试剂。

使用该方法配置Tris/Tris-HCl缓冲液的注意事项如下：

①为避免Tris-HCl含量波动等因素造成配置的缓冲液pH不稳定,建议采购质量可靠的药用级Tris及Tris-HCl产品。

②浓度及温度对Tris缓冲液pH均有较大影响,建议做上述实验时,保持与实际使用场景相同的温度与浓度,并在配置完成后最快时间进行测量,避免二氧化碳的干扰。

③若变更使用浓度或环境温度,需重新进行上述实验。