ELISA实验显色淡的原因及解决方案:
原因一:试剂盒在运输途中时间太长,温度太高。
解决方案:尽量缩短运输时间,夏季应放冰块降温。
原因二:试剂盒未充分平衡。
解决方案:试剂盒从2~8℃冰箱取出后打开盒盖,于室温平衡至少20分钟,确保所有试剂已平衡至室温(约25℃)。
原因三:培养箱温度不足37℃。
解决方案:注意培养箱温度,放入反应板后尽量减少开启次数以免影响温度恒定,非隔水式培养箱尤其应注意。
原因四:保温时间不足。
解决方案:校正定时钟准确定时。
原因五:洗涤时冲击力太大、浸泡时间过长、洗涤次数增加。
解决方案:按说明书要求保留洗涤时间,准确记住洗涤次数。
原因六:移液器吸液量不足,吸嘴内壁挂水太多或内壁不清洁。
解决方案:校正移液器,吸嘴要配套,装吸嘴时要紧密,吸嘴内壁要清洁,一次性使用。
原因七:蒸馏水水质有问题。
解决方案:使用新鲜合格的蒸馏。
原因八:底物作用时间不足。
解决方案:准确定时。
显色一定要控制时间,根据试剂盒说明操作即可。一般来说,显色时间过短,结果偏低;显色时间过长,空白增高或者非特异性显色增加。
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