本生试剂盒—有关试剂盒标准曲线做不好有哪些原因原因

试剂盒被广泛应用于各种抗原和抗体测定,但测定中影响因素较多,而且其操作中有一定的技术要求,在检测过程中除正常反应外,有时常见到一些错误的结果,引起测定错误结果的原因主要有：

(1)试剂盒因素

(2)标本因素

(3)操作因素

试剂盒需要注意的事项是：

1.在做完整的实验过仪器之前,仪器预热半小时,这个计算好时间,也可以直接将仪器一直开着,直到整个实验结束。

2.在加液过程中不要使枪头触及到板子底部,一般枪头都悬空,可以将枪头靠在孔边缘,

3.但枪头尖悬空,如果枪头上残留液体看整体多少量,不要吹打下去,特别忌讳在版孔内壁流向版孔,整个加液过程不要产生气泡(洗涤液除外)。

试剂盒标准曲线做不好的原因分析：

A、刚加完显色剂时梯度明显,显色液可能是从高浓度向低浓度孔加的。

B、酶浓度太高,导致zui后显色结果都是高的。

C、包被：酶标系统不匹配或者酶标的非特异反应太强,或者酶标仪读数范围不够。

D、样本中有能够催化底物的物质,没洗下来。

建议：包被、酶标重新做梯度,先用较低的浓度把梯度摸索好,然后再优化灵敏度,zui后调出所需的灵敏度、线性范围。

建议：有条件的话,可以把酶免的蛋白系统移植到板式化学发光上,加完底物三分钟读数。

建议：蛋白系统灵敏度够的话,显色十分钟就差不多了。

建议：酶是自己标的这种情况的,HRP比例不要太高。

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