植物ELISA试剂盒操作流程:
1.从室温平衡20min后的铝箔袋中取出所需板条,剩余板条用自封袋密封放回4℃。
2.设置标准品孔和样本孔,标准品孔各加不同浓度的标准品50μL;
3.样本孔中加入待测样本50μL;空白孔不加。
4.除空白孔外,标准品孔和样本孔中每孔加入辣根过氧化物酶(HRP)标记的检测抗体100μL,用封板膜封住反应孔,37℃水浴锅或恒温箱温育60min。
5.弃去液体,吸水纸上拍干,每孔加满洗涤液(350μL),静置1min,甩去洗涤液,吸水纸上拍干,如此重复洗板5次(也可用洗板机洗板)。
6.每孔加入底物A、B各50μL,37℃避光孵育15min。
7.每孔加入终止液50μL,15min内,在450nm波长处测定各孔的OD值。
植物ELISA试剂盒注意事项:
1.检测前,检查各种仪器,打开酶标仪,稳定20分钟左右。
2.检测样本要澄清,不能含杂物,否则会直接影响结果。
3.实验开始前要将试剂盒取出,室温放置30-40分钟,使各种试剂都恢复到室温,以使检测结果更为稳定。
4.尽量做双标准实验,这样可以保证数据的准确性。
5.底物具有毒性,终止液对皮肤有腐蚀性,要避免接触。
6.实验中,要使底物避光保存,酶标板均可拆卸,多余的部分应密封好
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