果胶甲酯酶比色法试剂盒主要用途
植物果胶甲酯酶（pectin methylesterase；PME）活性比色法定量检测试剂是一种旨在通过果胶甲酯酶和酒精氧化酶的酶偶联反应系统中产生的甲醛,与N-甲基苯噻唑啉酮-2-腙反应,酸性氧化后,产生蓝色甲簪产物,采用比色法测定其峰值的变化,以此进行测算单位酶活性的经典的技术方法。该技术经过精心研制、成功实验证明的。其适合于各种植物组织裂解悬液样品的果胶甲酯酶活性及其抑制剂的检测。产品不含污染性蛋白酶,严格无菌,即到即用,操作简捷,性能稳定,反应优化,检测敏感。
果胶甲酯酶比色法试剂盒检测原理
果胶甲酯酶（pectin methylesterase；PME；EC3.1.1.11）,又称为果胶酯酶（pectinesterase）,是一种细胞壁相关的果胶水解（pectolytic）酶蛋白,分子量为34－37kDa,存在于所有植物组织中,以及植物病源菌（真菌和细菌）里。果胶（pectin）是细胞壁的主要结构元素,占35％的多糖。果胶是同型聚糖半乳糖醛酸（homogalacturonan；HGA）和鼠李聚糖半乳糖醛酸（rhmnogalacturonan；RG）的复合物。其中80％的同型聚糖半乳糖醛酸为甲基酯化。果胶甲酯酶通过使果胶去酯化（deesterification）,产生水溶性的果胶酸（pectic acid）和甲醇。植物果胶甲酯酶分成2型：I型和II型。其功能在于参与植物发育、形态形成、成熟、细胞壁延展和稳固、水果软化脱落和衰老、防止感染等,以及细菌和真菌果胶降解等。果胶甲酯酶常用于果菜汁等的澄清、液化、和水果软化和成熟。基于底物果胶,在果胶甲酯酶的催化下,产生果胶酸和甲醇,进而在酒精氧化酶（alcohol oxidase）的作用下,产生并收集甲醛（aldehyde）,同时使用N-甲基苯噻唑啉酮-2-腙（N-methylbenzothiazolinone-2-hydrazone；MBTH）,在中性条件下,进行浓缩反应,酸化处理,在三价铁氧化剂的参与下,形成蓝色甲簪产物,在分光光度仪下（620nm波长）,来定量分析果胶甲酯酶的总活性。果胶甲酯酶酶偶联反应系统为：
pectin methylesterase
Pectin-COOCH3  +  2H2O →  Pectin-COO－  +  H3O－  +  CH3OH
alcohol oxidase
CH3OH  +  O2   →  H2C=O  +  H2O2
H2C=O  +  MBTH  +  Fe3+  →  blue formazan dye

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