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当前位置：上海抚生实业有限公司>>细胞系>>大鼠细胞系>> NR8383大鼠肺泡巨噬细胞
| 产地 | 国产 | 规格 | 1×106 |
|---|---|---|---|
| 级别 | 其他 | 货号 | A01X1137 |
| 英文名称 | NR8383细胞 | 报告 | （鼠源种属鉴定） |
| 实验类型 | F12K+15%FBS+1% L-谷氨酰胺+1%P/S |
NR8383大鼠肺泡巨噬细胞
名称 | NR8383 [AgC11x3A; NR8383.1] (大鼠肺泡巨噬细胞) (种属鉴定正确) |
别称 | NR-8383; NR 8383; NR8383.1; AgC11x3A; Normal Rat, August 3, 1983 |
种属 | 大鼠 |
年龄（性别） | 不详 |
组织来源 | 肺；巨噬细胞；肺泡 |
生长特性 | 半贴半悬 |
细胞形态 | 巨噬细胞样 |
背景描述 | NR8383细胞来源于肺灌洗时的正常大鼠肺泡巨噬细胞，NR8383细胞在Gerbil肺细胞连续培养液存在下培养了8-9个月。随后，NR8383细胞不再需要外源生长因子。通过有限稀释法，从单个细胞克隆并亚克隆NR8383细胞，并3次用软琼脂亚克隆。NR8383细胞表现出巨噬细胞的特性：吞噬酵母多糖和铜绿、非特异性脂酶活性、Fc受体、氧化降解；分泌IL-1、TNF-β和IL-6，可重复地响应外源生长因子。NR8383细胞响应莱霉素，分泌TNF-β前体。NR8383细胞在莱霉素刺激下，TNF-β mRNA表达也上升。NR8383细胞对内毒素敏感，1-10ng/ml的LPS水平抑制增生达50%。即使达到0.001mg/ml的水平，LPS抑制还是无毒且在后续过程中可逆的。NR8383细胞提供了高响应的肺泡巨噬细胞的均一来源，可以用于体外研究巨响细胞相关活性，此细胞悬浮-贴壁混合生长。 |
生物安全等级 | 1 |
生长培养基 | Ham's F-12K＋20% FBS＋1% P/S |
推荐传代比例 | 1-4×10^5个/mL |
推荐换液频率 | 2~3次/周 |
冻存条件 | 冻存液：55% 基础培养基+40%FBS+5%DMSO 温度：液氮 |
培养条件 | 气相：空气，95%；CO2，5% 温度：37℃ |
受体表达情况 | Fc |
基因表达情况 | transforming growth factor beta (TGF beta); interleukin 1 (IL-1); interleukin 6 (IL-6) |
保藏机构 | ATCC; CRL-2192 |
二、细胞培养操作
1) 复苏细胞：以下细胞培养冻存处理仅供参考，具体操作步骤以随货产品说明书为主。将含有1 mL细胞悬液的冻存管在 37℃水浴中迅速摇晃解冻，加4 mL培养基混合均匀。在1000 rpm条件下离心3 min，弃去上清液，加1-2 mL培养基后吹匀。然后将所有细胞悬液加入含适量培养基的培养瓶中培养过夜（或将细胞悬液加入10 cm皿中，加入约8 mL培养基，培养过夜）。第二天换液并检查细胞密度。
2) 细胞传代：如果细胞密度达 80%-90%，即可进行传代培养。
a、弃去培养上清，用不含钙、镁离子的PBS润洗细胞1-2次。
b、加1 mL消化液（0.25%Trypsin-0.53mM EDTA）于培养瓶中，使消化液浸润所有细胞，将培养瓶置于37℃培养箱中消化1-2 min（视细胞情况而定），然后在显微镜下观察细胞消化情况，若细胞大部分变圆并脱落，迅速拿回操作台，轻敲几下培养瓶后加2-3ml培养基终止消化。轻轻打匀后装入无菌离心管中，1000 rpm离心5 min，弃去上清液，补加1-2 mL培养液后吹匀。
c、将细胞悬液按1:2比例分到新的含8 mL培养基的新皿中或者瓶中，置于培养箱中培养。
3) 细胞冻存：待细胞生长状态良好时，可进行细胞冻存。下面 T25 瓶为例；
a、收集细胞及细胞培养液，装入无菌离心管中，1000 rpm条件下离心4 min，弃去上清液，用PBS清洗一遍，弃尽PBS，进行细胞计数。
b、根据细胞数量加入无血清细胞冻存液，使细胞密度5×106~1×107/mL，轻轻混匀，每支冻存管冻存1mL细胞悬液，注意冻存管做好标识。将冻存管放入-80℃冰箱，24 h后转入液氮灌储存。记录冻存管位置以便下次拿取。
三、培养注意事项
1. 收到细胞后首先观察细胞瓶是否完好，培养液是否有漏液、浑浊等现象，若有上述现象 发生请及时和我们联系。
2. 仔细阅读细胞说明书，了解细胞相关信息，如细胞形态、所用培养基、血清比例、所需 细胞因子等，确保细胞培养条件一致，若由于培养条件不一致而导致细胞出现问题，责任由 客户自行承担。
3. 用 75%酒精擦拭细胞瓶表面，显微镜下观察细胞状态。因运输问题，部分细胞由于温度 变化及剧烈碰亡破碎形成碎片，是正常现象。观察好细胞状态后，75%酒精消毒瓶壁将 T25 瓶置于 37℃培养箱放置 2-4h。
4. 贴壁细胞可以消化，悬浮细胞直接混匀收集细胞，900 rpm-1000 rpm 离心 3 min，弃上 清。加 5 mL PBS 重悬细胞，再 900 rpm-1000 rpm 离心 3 min，用新鲜的培养基重悬 细胞，并接种到新的培养瓶或培养皿中，置于培养箱中进行培养。
5. 请客户用相同条件的培养基用于细胞培养。
6. 建议客户收到细胞后前 3 天各拍几张细胞照片，记录细胞状态，便于和我司技术部沟通 交流。由于运输的原因，个别敏感细胞会出现不稳定的情况，请及时和我们联系，告知细胞 的具体情况，以便我们的技术人员跟踪回访直至问题解决。
7. 该细胞仅供科研使用。
8. 备注：运输用的培养基 (灌液培养基) 不能再用来培养细胞，请换用按照说明书细胞培 养条件新配制的培养基来培养细胞。 收到细胞后第一次传代建议 1：2 传代。
9. 注意： 1:2 传代就是 1 个 T25 瓶传 2 个 T25 瓶或者 2 个 6cm 皿。不是 1 个 T25 瓶传 2 个10cm 皿。
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