当前位置:上海抚生实业有限公司>>PCR相关试剂>>核酸纯化>> A-PJ1009Bst 4.0 Basic Bead
商品属性:
产品名称 | 规格 | 货号 |
Bst 4.0 Basic Bead | 100Tx25μl | A-PJ1009 |
产品介绍:
该制品为全体系冻干微球制品,内含恒温扩增所用的反应缓冲液、Mg2+、dNTP、Bst 4.0 DNA/RNA 聚合酶等,其不包含任何染料,使用时只需要加入引物、模板即可进行核酸恒温扩增。Bst 4.0 DNA/RNA 聚合酶具有依赖于 RNA 模板的聚合酶活性(逆转录),还具有依赖于DNA 的聚合酶活性,因此无论 DNA 或 RNA 样本均可使用该制品进行恒温扩增。该制品是进行 LAMP 及RT-LAMP 扩增反应的试剂。
本制品不包含任何显色染料,可自行搭配相关染料或检测手段进行 LAMP 反应,包括搭配 OG 染料管进行橙绿变色、搭配标记 Oligo 进行试纸条检测、搭配荧光染料进行荧光检测、搭配 Molecular Beacon 探针进行荧光检测等方法。
储存:-20℃保存 2 年;室温(25℃)保存>6 个月。
使用方法:(进行 LAMP 橙绿变色扩增):
1. 关于 OG 橙绿变色管说明:橙绿变色染料(OG Dye)以烘干的形式预加在8联管盖上。LAMP反应完毕后,将 0.2ml EP 管颠倒溶解 OG 染料后。LAMP的反应产物将与 OG 染料形成绿色肉眼可见变色反应(阳性),而未扩增的 EP 管为深橙色(阴性)。本试剂管常温长期保存。
2. 配制变色 LAMP 反应体系
在 OG 染料管(0.2ml EP)反应管中加入下述试剂
Bst4.0 Basic Bead 1 粒
10xLAMP Primer Mix 2.5 μl
模板 DNA/RNA X μl
ddH2O 到总体积 25 μl
10xLAMP Primer Mix 浓度:FIP/BIP 分别为 16 μM、
注意:全部试剂加入完毕后,轻弹 EP 管底部后,再盖上 OG 橙
3. 反应体系配好后,置于 65°C 进行反应 15~30min。(扩增良好的引物组合,通常 20min 即可变色,一般不超过30min)。
4. 观察结果:反应结束后,从加热装置中将反应管取出,室温 2min,使整个反应管冷却下来。再次用力将反应管
注意:
(1)观察结果时,尽可能不要与配制反应空间共用,以防止污染操作台。
(2)尽管 选取的为高密封
注意事项:
(1)关于矿物油的使用,在配制完 LAMP 反应体系后,可加入一滴矿物油覆盖于反应液上部,以减少气溶胶的污
(2)在使用其它荧光染料时,使用浓度可自行优化,通染料可能导致扩增失败。
(3)本试剂不支持,浊度、pH 变色、HNB 变色反应,请勿尝试。
(4)关于 LAMP 成品试剂的建议, Bst 4.0 Basic Bead冻干球和 OG 橙绿变色管均为室温稳定状态,可长期保存。将扩增引物加入到 OG 橙绿变色管底部,于 70°C 烘干,再加入一粒冻干球即可制备成全体系检测试剂。
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