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镰刀菌通用PCR检测试剂盒供应商

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更新时间:2019-04-30 14:40:08浏览次数:4138次

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镰刀菌通用PCR检测试剂盒供应商是即用型PCR试剂盒的改良产品, 含有Taq DNA 聚合酶、dNTPs、MgCl2、反应缓冲液、PCR 增强剂、上样染料等所有PCR 所需要的成分,用户只需加入模板和引物即可进行PCR 反应,具有广泛的用途。

反应五要素:
参加PCR反应的物质主要有五种即引物、酶、dNTP、模板和Mg2+
引物:引物是PCR特异性反应的关键,PCR 产物的特异性取决于引物与模板DNA互补的程度。理论上,只要知道任何一段模板DNA序列, 就能按其设计互补的寡核苷酸链做引物,利用PCR就可将模板DNA在体外大量扩增。设计引物应遵循以下原则:
①引物长度: 15-30bp,常用为20bp左右。
②引物扩增跨度: 以200-500bp为宜,特定条件下可扩增长至10kb的片段。
③引物碱基:G+C含量以40-60%为宜,G+C太少扩增效果不佳,G+C过多易出现非特异条带。ATGC随机分布,避免5个以上的嘌呤或嘧啶核苷酸的成串排列。
④避免引物内部出现二级结构,避免两条引物间互补,特别是3'端的互补,否则会形成引物二聚体,产生非特异的扩增条带。
⑤引物3'端的碱基,特别是末及倒数第二个碱基,应严格要求配对,以避免因末端碱基不配对而导致PCR失败。
⑥引物中有或能加上合适的酶切位点, 被扩增的靶序列有适宜的酶切位点, 这对酶切分析或分子克隆很有好处。
⑦引物的特异性:引物应与核酸序列数据库的其它序列无明显同源性。
引物量:每条引物的浓度0.1~1umol或10~100pmol,以低引物量产生所需要的结果为好,引物浓度偏高会引起错配和非特异性扩增,且可增加引物之间形成二聚体的机会。

产品名称

镰刀菌通用PCR检测试剂盒供应商

英文名称

Fusarium spp.PCR

分类

PCR检测试剂盒

特点:
高特异性:与其他病毒无交叉反应,无非特异性扩增;
高灵敏度:检测灵敏度可达10~100;
操作简便:该系列所有试剂均采用相同的体系和条件,可同时进行多个检测;
高通量:多种双重PCR检测以及三重PCR检测试剂盒。

样品 DNA 的制备:
1.用自选方法纯化样品的 DNA,本试剂盒跟市场上大多数病毒 DNA 提取试剂盒兼 容。。也可以选购本公司的一管式病毒 DNAout 或其升级版柱式病毒 DNAout。 本试剂盒免费赠送 15 次 DNA 病毒裂解液试用装(一管式病毒 DNAout 的成分)。
稀释阳性对照(以 10E2-10E7 这 6 个 10 倍稀释度为例。由于标准品浓度非常高,因此下列稀释操作一定要在独立的区域进行,千万不能污染样品或本试剂盒的其他成分)。为增加产品稳定性和避免扩散传染性病原,本产品不提供活体样品做阳性对照,只提供可以直接使用的长为 86bp 的 DNA 片段作为阳性对照。
2.标记 6 个离心管,分别为 7,6,5,4,3,2。
3.用带芯枪头分别加入 45 μL 模板稀释液(用带芯枪头,下同)。
4.在 7 号管中加入 5 μL 1×10E8 拷贝/μL 的阳性对照,充分震荡 1 分钟,得1×10E7 拷贝/μL 的阳性对照。放冰上待用。5.换枪头,在 6 号管中加入 5 μL 1×10E7 拷贝/μL 的阳性对照(上步稀释所得),充分震荡 1 分钟,得 1×10E6 拷贝/μL 的阳性对照。放冰上待用。
6.换枪头,在 5 号管中加入 5 μL 1×10E6 拷贝/μL 的阳性对照到 5 号管中,充分震荡 1 分钟,得 1×10E5 拷贝/μL 的阳性对照。放冰上待用。
7.换枪头,在 4 号管中加 5 μL 1×10E5 拷贝/μL 的阳性对照到 4 号管中,得1×10E4 拷贝/μL 的阳性对照。放冰上待用。8.重复上面的操作直到得到 6 个稀释度的阳性对照。放冰上待用。

使用及效果:
PCR反应特点
(1) 特异性强
PCR反应的特异性决定因素为:
①引物与模板DNA特异正确的结合;
②碱基配对原则;
③Taq DNA聚合酶合成反应的忠实性;
④靶基因的特异性与保守性。
其中引物与模板的正确结合是关键。引物与模板的结合及引物链的延伸是遵循碱基配对原则的。聚合酶合成反应的忠实性及Taq DNA聚合酶耐高温性,使反应中模板与引物的结合(复性)可以在较高的温度下进行,结合的特异性大大增加,被扩增的靶基因片段也就能保持很高的正确度。再通过选择特异性和保守性高的靶基因区,其特异性程度就更高。
(2) 灵敏度高
PCR产物的生成量是以指数方式增加的,能将皮克(pg=10-12g)量级的起始待测模板扩增到微克(ug=10-6g)水平。能从100万个细胞中检出一个靶细胞;在病毒的检测中,PCR的灵敏度可达3个RFU(空斑形成单位);在细菌学中zui小检出率为3个细菌。
(3) 简便、快速
PCR反应用耐高温的Taq DNA聚合酶,一次性地将反应液加好后,即在DNA扩增液和水浴锅上进行变性-退火-延伸反应,一般在2~4 小时完成扩增反应。扩增产物一般用电泳分析,不一定要用同位素,无放射性污染、易推广。
(4) 对标本的纯度要求低
不需要分离病毒或细菌及培养细胞,DNA 粗制品及总RNA均可作为扩增模板。可直接用临床标本如血液、体腔液、洗嗽液、毛发、细胞、活PCR技术概论。

人胃平滑肌细胞,HGSMC细胞 20mg HPLC≥98%Theobromine用于含量测定5 x 10^5 cells/T25培养瓶可可碱

Interferonalpha-B/IFNA8抗體,兔多抗,抗原親和純化25MLELISA   乙二单丁基 Ethylene Glycol Monobutyl Ether >99.0%(GC)

人刺鼠色蛋白相关蛋白(AGRP)ELISA试剂盒78281-02-4 20mgHydroxysafflor yellow A HPLC≥98% 3.12-200 U/L羟基红花黄色素A

ELISAKitforHumanAquaporin-217650-84-9 20mgKaempferol-3-O-rutinoside HPLC≥98% 0.78-50 ng/mL山-3-O-芸香糖苷;莰菲-3-O-芸香糖苷

ELISAKitforDeoxypyridinoline87701-68-6 20mg Alismoxide 0.312-20 ng/mL环氧泽泻

NRG4抗體,兔多抗,抗原親和純化64809-67-2C25H28O16Neomangiferin≥98%ELISA   新芒果苷

人骨涎蛋白(BSP)ELISA试剂盒13241-28-610mg  Chrysophanol 8-O-beta-D-glucoside 78-5000 pg/mL大黄-8-O-β-葡萄糖苷

月桂基硫酸盐胰蛋白胨肉汤(LST)5g 250gAdenosine 腺苷

ELISAKitforHumanMucin-1625mg 3.12-200 U/mL5-氨基乙酰丙酸 AMINOLEVULINIC ACID, 5-(RG)

葡萄糖ENZ-KIT149-0001 20支高灵敏度的胰岛素原的检测试剂盒

人原代NaiveTcell细胞 20mg HPLC≥98%Triptolide用于含量测定5 x 10^5 cells/T25培养瓶雷公藤素;雷公藤内酯;雷公藤多甙

人高转移性肝癌细胞,MHCC-97H细胞 20mg HPLC≥98%Thiocolchicoside硫秋水仙苷 602-41-51 x 10^6 cells/T25培养瓶硫秋水仙苷;噻可撒可

LAMP-1/CD107a/LAMP1抗體(PE),鼠單抗1gFCM   肉桂酸苄酯 BENZYL CINNAMATE(P)

ELISAKitforHumanRadicalS-adenosylmethioninedomain-containingprotein210mg 0.78-50 ng/mL苯酰基-(2R,3S)-3-苯基异丝氨酸酯(紫杉侧链) BENZYLOXYPHENYLISOSERINE METHYLESTER,N-(P)

ELF3抗體,兔多抗,抗原親和純化 629-78-7 1g 0.994WB   IF   ICC/IF  十七烷

人E3泛素蛋白连接酶CBL-B(E3ubiquitin-proteinligaseCBL-B)ELISA试剂盒 53947-92-5 20mg Corylin  7.8-500 ng/mL补骨脂宁

镰刀菌通用PCR检测试剂盒供应商亚硝酰基催化剂nor-AZADO  016-24923 葡萄球菌选择性琼脂/贝尔德-帕克琼脂/StaphylococcusSelectiveAgar/BairdParkerAgar

拟人参皂苷RT5 20mg Pseudoginsenoside RT5 ELISAKitforHumanAzurocidin HPLC≥98%

香芹 CARVACROL(ISOTHYMOL)(P)  250mg Thioredoxin/TXN抗體,兔多抗

花生酸/二十烷酸 ARACHIDIC ACID(RG)(PLEASE CALL)  250mg ELISAKitforHumanSpondin-2

荭草苷 HPLC≥98% A0323 GBA3抗體(FITC),鼠單抗 20mg/支

Oxyteracycline HCL土霉素  10g Campy-Cefex添加剂

PVPP 聚乙聚咯烷铜  50g BIGGY琼脂

基莲心碱 20mg  Neferine 人二氢叶酸还原酶(Dihydrofolatereductase)ELISA试剂盒

 

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