紧密着色霉PCR检测试剂盒说明书 返回列表页

特点：
高特异性：与其他病毒无交叉反应，无非特异性扩增；
高灵敏度：检测灵敏度可达10~100；
操作简便：该系列所有试剂均采用相同的体系和条件，可同时进行多个检测；
高通量：多种双重PCR检测以及三重PCR检测试剂盒。

样品 DNA 的制备：
1.用自选方法纯化样品的 DNA，本试剂盒跟市场上大多数病毒 DNA 提取试剂盒兼 容。。也可以选购本公司的一管式病毒 DNAout 或其升级版柱式病毒 DNAout。 本试剂盒免费赠送 15 次 DNA 病毒裂解液试用装（一管式病毒 DNAout 的成分）。
稀释阳性对照（以 10E2-10E7 这 6 个 10 倍稀释度为例。由于标准品浓度非常高，因此下列稀释操作一定要在独立的区域进行，千万不能污染样品或本试剂盒的其他成分）。为增加产品稳定性和避免扩散传染性病原，本产品不提供活体样品做阳性对照，只提供可以直接使用的长为 86bp 的 DNA 片段作为阳性对照。
2.标记 6 个离心管，分别为 7，6，5，4，3，2。
3.用带芯枪头分别加入 45 μL 模板稀释液（用带芯枪头，下同）。
4.在 7 号管中加入 5 μL 1×10E8 拷贝/μL 的阳性对照，充分震荡 1 分钟，得1×10E7 拷贝/μL 的阳性对照。放冰上待用。5.换枪头，在 6 号管中加入 5 μL 1×10E7 拷贝/μL 的阳性对照(上步稀释所得)，充分震荡 1 分钟，得 1×10E6 拷贝/μL 的阳性对照。放冰上待用。
6.换枪头，在 5 号管中加入 5 μL 1×10E6 拷贝/μL 的阳性对照到 5 号管中，充分震荡 1 分钟，得 1×10E5 拷贝/μL 的阳性对照。放冰上待用。
7.换枪头，在 4 号管中加 5 μL 1×10E5 拷贝/μL 的阳性对照到 4 号管中，得1×10E4 拷贝/μL 的阳性对照。放冰上待用。8.重复上面的操作直到得到 6 个稀释度的阳性对照。放冰上待用。
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使用及效果：
PCR反应特点
(1) 特异性强
PCR反应的特异性决定因素为：
①引物与模板DNA特异正确的结合；
②碱基配对原则；
③Taq DNA聚合酶合成反应的忠实性；
④靶基因的特异性与保守性。
其中引物与模板的正确结合是关键。引物与模板的结合及引物链的延伸是遵循碱基配对原则的。聚合酶合成反应的忠实性及Taq DNA聚合酶耐高温性，使反应中模板与引物的结合(复性)可以在较高的温度下进行，结合的特异性大大增加，被扩增的靶基因片段也就能保持很高的正确度。再通过选择特异性和保守性高的靶基因区，其特异性程度就更高。
(2) 灵敏度高
PCR产物的生成量是以指数方式增加的，能将皮克(pg=10-12g)量级的起始待测模板扩增到微克(ug=10-6g)水平。能从100万个细胞中检出一个靶细胞；在病毒的检测中，PCR的灵敏度可达3个RFU(空斑形成单位)；在细菌学中zui小检出率为3个细菌。
(3) 简便、快速
PCR反应用耐高温的Taq DNA聚合酶，一次性地将反应液加好后，即在DNA扩增液和水浴锅上进行变性-退火-延伸反应，一般在2～4 小时完成扩增反应。扩增产物一般用电泳分析，不一定要用同位素，无放射性污染、易推广。
(4) 对标本的纯度要求低
不需要分离病毒或细菌及培养细胞，DNA 粗制品及总RNA均可作为扩增模板。可直接用临床标本如血液、体腔液、洗嗽液、毛发、细胞、活PCR技术概论。

反应五要素：
参加PCR反应的物质主要有五种即引物、酶、dNTP、模板和Mg2+
引物：引物是PCR特异性反应的关键，PCR 产物的特异性取决于引物与模板DNA互补的程度。理论上，只要知道任何一段模板DNA序列， 就能按其设计互补的寡核苷酸链做引物，利用PCR就可将模板DNA在体外大量扩增。设计引物应遵循以下原则：
①引物长度： 15-30bp，常用为20bp左右。
②引物扩增跨度： 以200-500bp为宜，特定条件下可扩增长至10kb的片段。
③引物碱基：G+C含量以40-60%为宜，G+C太少扩增效果不佳，G+C过多易出现非特异条带。ATGC随机分布，避免5个以上的嘌呤或嘧啶核苷酸的成串排列。
④避免引物内部出现二级结构，避免两条引物间互补，特别是3'端的互补，否则会形成引物二聚体，产生非特异的扩增条带。
⑤引物3'端的碱基，特别是末及倒数第二个碱基，应严格要求配对，以避免因末端碱基不配对而导致PCR失败。
⑥引物中有或能加上合适的酶切位点， 被扩增的靶序列有适宜的酶切位点， 这对酶切分析或分子克隆很有好处。
⑦引物的特异性：引物应与核酸序列数据库的其它序列无明显同源性。
引物量：每条引物的浓度0.1～1umol或10～100pmol，以低引物量产生所需要的结果为好，引物浓度偏高会引起错配和非特异性扩增，且可增加引物之间形成二聚体的机会。

FDPS/FarnesylDiphosphateSynthase抗體,兔多抗19275-46-8C24H26O73-Isomangostin≥98%ELISA   3-异倒捻子素

人白三B4受体1(LTB4R)ELISA试剂盒10mg 0.78-50 ng/mL1-十六烷/鲸蜡 CETYL ALCOHOL(1-HEXADECANOL)(SG)

沙门氏志贺氏增菌液100ml/500ml 250g溴绿-基红指示剂溶液

ELISAKitforHumanProstateandrogen-regulatedmucin-likeprotein11mg 0.312-20 ng/mLGoldenseal (Hydrastis canadensis) Rhizome Extract #2 BXL(REQUEST QUOTE)

缓冲蛋白胨水/缓冲蛋白胨水增菌液/BPW13477-34-4沙门氏菌前增菌培养和李氏菌前增菌培养wako 13477-34-4 子起生物

人肿瘤坏死因子α诱导蛋白3(TNFalpha-inducedprotein3)ELISA试剂盒250mg 0.312-20 ng/mL硝阿托品 ATROPINE METHYL NITRATE(SH)

猪内源性逆转录病毒前病毒(PERV-pre)核酸检测试剂盒115909-22-3 20mgAngoroside C HPLC≥98% 0.312-20 ng/mL安格洛苷C

Cadherin-12/CDH12抗體(FITC),鼠單抗10mgFCM   盐酸小檗碱 BERBERINE CHLORIDE(P) (AHP Verified)

ELISAKitforHumanC-Cchemokinereceptortype7633-65-8 20mg  Berberine hydrochloride  78-5000 pg/mL盐酸小檗碱

CoagulationFactorIX/FIX/F9抗體,兔多抗84-26-4HPLC≥98%A026720mg/支ELISA   吴茱萸次碱

人巨噬细胞炎性蛋白3β(MIP-3β/ELC/CCL19)ELISA试剂盒88495-63-0 20mg Artesunate 0.78-50 ng/mL青蒿琥酯

FumarateHydratase抗體,兔多抗30964-13-7，19870-46-3C25H24O121,5-Dicaffeoylquinic acid，Cynarin，Cynarine≥98%ELISA   1,5-二咖酰奎宁酸

ELISAKitforHumanHexokinase-153584-69-310mg Isorhamnetin-3-O-robinobioside 78-5000 pg/mL异鼠李素-3-O-刺槐二糖苷

MUG培养基250mg 100g硝基氯化四氮唑蓝(INT ）

人髓磷脂碱性蛋白(MBP)ELISA试剂盒500G 0.312-20 ng/mL4-溴苯 4-Bromotoluene >99.0%(GC)

型流感病毒H3亚型(IAV-H3)核酸检测试剂盒(PCR-荧光探针法)14216-03-6 20mgHederacoside C HPLC≥98% 0.156-10 ng/mL常春藤苷C；常春藤甙C

紧密着色霉PCR检测试剂盒说明书Germander (Teucrium chamaedrys) Aerial Parts Extract #6 BXL(REQUEST QUOTE)  1mg ELISAKitforHumanPhosphatidylinositol-5-phosphate4-kinasetype-2gamma

1,4-对苯醌 BENZOQUINONE, 1,4-(P)  200mg 人角蛋白20(KRT20)ELISA试剂盒

石杉碱  HPLC≥98% Huperzine A 小鼠精原细胞 用于含量测定

59917-39-4 Vindesine Sulfate  59917-39-4 鹅去氧胆酸/CDCA

宝藿苷 I BAOHUOSIDE I(P)  5mg ELISAKitforHumanRegeneratingislet-derivedprotein3-alpha

(6-溴-2-萘基)-α-D-半糖苷 BROMO-2-NAPHTHYL-a-D-GALACTOPYRANOSIDE, 6-(RG)(PLEASE CALL)   ELISAKitforHumanKlotho

抗坏血酸/维生素 C ASCORBIC ACID, L-(+)-(VITAMIN C)(RG)  1g 人色胺酸羟化酶2(TPH2)ELISA试剂盒

朝藿定A1 HPLC≥98% A0518 CD226/DNAM-1抗體,兔多抗 20mg/支