医药工业洁净室（区）浮游菌的测试方法

测试仪器、辅助设备和培养基

选择合适的浮游菌采样器,包括采用无油的抽气泵,较低的气流流速和较大的采样流量,以保证培养基表面的水分不被吹干。

本测试需要具备仪器、辅助设备和培养基如下:

a.浮游菌采样器

b.培养皿

c.培养基

d.恒温培养箱

e.高压蒸汽灭菌器。

测试要点

1.必须按照测试仪器的检定周期,定期对仪器作检定。使用校验合格,且在使用有效期内的仪器。

2.测试仪器在未进入被测区域时,若必需则先清洁表面,或在相应的洁净室内准备和存放(用保护罩或其他适当地外罩保护仪器)。

3.在100级洁净室内用纸时,上面应蒙上一张透明不沾尘的覆盖物,在100级洁净室内不能用铅笔和橡皮。

4.使用测试仪器时,应严格按照仪器说明书操作。

5.仪器开机,预热至稳定后,方可按仪器说明书的规定对仪器进行校正,同时检查采样流量,并根据采样量设定采样时间。

6.采样口必须用便于消毒及化学性能稳定的材料制造。

7.采样管严禁渗漏,内壁应光滑。

8.采样管的长度应根据测点的高度定,尽量减少弯曲。

测试步骤

1.测试前,仪器、培养皿表面必须严格消毒。

（1）采样器进入被测房间前先用消毒房间的消毒剂灭菌,用于100级洁净室的采样器宜预先放在被测房间内。

（2）用消毒剂擦净培养皿的外表面。

（3）采样前,先用消毒剂清洗釆样器的顶盖、转盘以及罩子的内外面采样结束,再用消毒剂轻轻喷射罩子的内壁和转盘。

（4）采样口及采样管,使用前必须高温灭菌。如用消毒剂对采样管的外壁及内壁进行消毒时,应将管中的残留液倒掉并晾干。

（5）采样者应穿戴与被测洁净区域相应的工作服,在转盘上放入或调换培养皿前,双手用消毒剂消毒或戴无菌手套操作。

（6）采样仪器经消毒后先不放入培养皿,开启浮游菌釆样器,使仪器中的残余消毒剂蒸发时间不少于5min,并检查流量并根据采样量调整设定采样时间。

（7）关闭浮游菌采样器,放入培养皿,盖上盖子。

（8）置采样口于采样点后,开启浮游菌采样器进行采样。

2.培养

（1）全部采样结束后,将培养皿倒置于恒温培养箱中培养。

（2）采用大豆酩蛋白琼脂培养基(TSA)配制的培养皿经采样后,,在30℃~35℃培养箱中培养,时间不少于2d；采用沙氏培养基(SDA)配制的培养皿经采样后,在20℃~25℃培养箱中培养,时间不少于5d。

（3）每批培养基应有对照试验,检验培养基本身是否污染。可每批选定3只培养皿作对照培养。

3.菌落计数

（1）用肉眼对培养皿上所有的菌落直接计数、标记或在菌落计数器上点计,然后用5~10倍放大镜检查,有否遗漏。

（2）若平板上有2个或2个以上的菌落重叠,可分辨时仍以2个或2个以上菌落计数。

4.注意事项

（1）使用前应仔细检查每个培养皿的质量,培养基及培养皿有变质、破损或污染的不能使用。

（2）对培养基、培养条件及其他参数作详细的记录。

（3）由于细菌种类繁多,差别甚大,计数时一般用透射光于培养皿背面或正面仔细观察,不要漏计培养皿边缘生长的菌落,并须注意细菌菌落或培养基沉淀物的区别,必要时用显微镜鉴别。

测试条件

在测试之前,要对洁净室(区)相关参数进行预先测试,这类测试将会提供测试悬浮粒子的环境条件,例如:这种预先测试或可包括:

1.温度和相对湿度的测试。洁净室(区)的温度和相对湿度应与其生产及工艺要求相适应(无特殊要求时,温度在18℃~26℃,相对湿度在45%~65%为宜),同时应满足测试仪器的使用范围。

2.室内送风量或风速的测试,或压差的测试。

3.高效过滤器的泄漏测试。

测试状态

1.静态和动态两种状态均可进行测试。

2.静态测试时,室内测试人员不得多于2人。

3.浮游菌测试前,被测洁净室(区)由用户决定是否需要预先消毒。

4.测试报告中应标明测试时所采用的状态和室内测试人员数。

测试时间

1.在空态或静态a测试时,对单向流洁净室(区)而言,测试宜在净化空气调节系统正常运行时间不少于10min后开始。对非单向流洁净室(区),测试宜在净化空气调节系统正常运行时间不少于30min后开始。在静态b测试时,对单向流洁净室(区),测试宜在生产操作人员撤离现场并经过10min自净后开始；对非单向流洁净室(区),测试宜在生产操作人员撤离现场并经过20min自净后开始。

2.在动态测试时,则须记录生产开始的时间以及测试时间。