详细介绍
超声波工业分散器 VC 750,可安全处理各种有机和无机材料,从250微升升至1升*。典型应用包括纳米技术(生产纳米颗粒材料和石墨烯分散体),细胞裂解,样品制备,均质化,ChIP测定,乳化,解聚和解聚,以及声化学液体处理领域的应用。
◆能量监视器
◆集成温度控制器防止样品过热,监测并控制样品处理温度在1℃至100℃范围内
◆数字电表
◆基于微处理器和可编程
◆10小时流程计时器
◆独立开/关脉冲发生器
◆可变功率输出控制
实验目的 |
1、了解超声细胞破碎的基本原理
2、掌握超声细胞破碎的基本技术
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实验原理 |
强声波作用溶液时,气泡产生、长大和破碎的空化现象有关,空化现象引起的冲击波和剪刀力使细胞裂解。 |
材料和试剂 |
细菌10ml、烧杯、刨冰、75%酒精棉球。 |
探头型号大小 破碎细胞容量 |
2mm150ul-5ml 3mm200ul-10ml 6mm10ml-50ml 10mm50ml-250ml 13mm200ml-1000ml |
型号 |
VCX 750 |
频率 |
20KHz |
功率 |
750W |
标配变幅杆 |
Φ10mm |
标配变幅杆处理量 |
50ml至250ml |
标配变幅杆长度 |
113mm |
变幅杆整体尺寸 |
235 x 190 x 340 mm |
变幅杆材质 |
钛合金Ti-6Al-4V |
可选变幅杆 |
Φ32mm,Φ146mm |
变幅杆重量 |
900g |
变幅杆电缆长度 |
1.8m |
破碎容量 |
50-1000ml |
占空比 |
1-99% |
功率调节范围 |
连续可调(20-750w) |
间隙时间 |
0.1-99.9s |
温度保护设定 |
有,能量和温度设定点控制 |
功率振幅显示 |
有 |
工作频率范围 |
能量监视器数字式瓦特计自动调谐自动振幅补偿 |
工作时间 |
基于微处理器的-可编程的10小时计时器1 - 59秒独立于/关闭脉冲 |
超声时间 |
从1秒到10小时 |
工作模式 |
间隙/连续 |
电源 |
220/110V 50Hz/60Hz或者 除非有其他要求,否则电要求以117V、50/60Hz发送 |
净重 |
6.8kg |
主机+换能器重量 |
3680g |
超声波发生器 |
一台 |
隔音箱 |
选购 |
工具箱 |
第88 - 00041转换器和一个红色的扳手 |
工具箱 |
第88 - 00026和一个蓝色扳手 |
电源线 |
一根 |
温度探头 |
不锈钢材料(可选附件),编号830-00060 |
专用破碎杯 |
选购 |
使用说明书 |
一份 |
备注说明 |
除非另有要求,运输完成并准备使用带有可更换的1/2"(13 mm)探头,**工具包和使用手册。**处理含有机溶剂或低表面张力液体的样品时,请勿使用具有可更换的探头。使用固体探头零件号630-0219。除非另有要求,所提供的探头将具有可更换的。 |
谨慎 |
所有的探测器,包括那些有可替换的的探测器,都能在20khz共振。如果可替换的提示被删除或删除与探测器的其余部分分离,这个元素将不再共振20千赫,而电源将进入一个过载条件,关闭或失败。有机溶剂(如。和低表面张力液体穿透探测器和可更换的之间的接口,从而将微粒带进螺纹部分并将从探针中分离出来。当处理含有有机溶剂或低表面张力的样品时液体,总是使用固体探测器或作为一个备用的全波10(254毫米)探测器或扩展器。 |
细胞破碎的方法:
一、机械破碎法:是指利用捣碎机、研磨器或匀浆器 等将细胞破碎开来 。
1.高速组织捣碎:将材料配成稀糊状液,放置于筒内约1/3体积,盖紧筒盖,将调速器先拨至最慢处,开动开关后,逐步加速至所需速度。此法适用于动物内脏组织、植物肉质种子等。
2.玻璃匀浆器匀浆:先将剪碎的组织置于管中,再套入研杆来回研磨,上下移动,即可将细胞研碎,此法细胞破碎程度比高速组织捣碎机为高,适用于量少和动物脏器组织。
二、物理破碎法:指利用温度差、压力差或超声波等将细胞破碎开来。
1:用一定功率的超声波处理细胞悬液,使细胞急剧震荡破裂(借助超声的震动力破碎细胞壁和细胞器)。
机制:可能与强声波作用溶液时,气泡产生、长大和破碎的空化现象有关,空化现象引起的冲击波和剪刀力使细胞裂解。
超声波破碎的效率取决于声频、声能、处理时间、细胞浓度和细胞类型等。(使用时注意降温,防止过热)。
2.高压破碎:细胞悬浮液从高压室的环状隙喷射到静止的撞击环上,被迫改变方向经出口管流出。此过程中细胞经历了高速造成的剪切的碰撞及高压到常压的变化,从而破碎释放内含物。
这是一种温和的、破碎细胞的较理想的方法。
3.反复冻融法:将细胞在-20度以下冰冻,室温融解,反复几次,由于细胞内冰粒形成和剩余细胞液的盐浓度增高引起溶胀,使细胞结构破碎。
三、化学破碎法:指利用甲醛、丙酮等有机溶剂或表面活性剂作用于细胞膜,使细胞膜的结构遭到破坏或透性发生改变 。
有些动物细胞,例如肿瘤细胞可采用十二烷基磺酸钠(SDS)、去氧胆酸钠等细胞膜破坏。浓度一般为1mg/ml。
四、酶学破碎法 :选用合适的酶,使细胞壁遭到破坏,进而在低渗溶液中将原生质体破碎开来。
细菌细胞壁较厚,可采用处理效果更好。
裂解液标准配方: :50mM Tris-HCl(pH8.5~9.0), 2mM EDTA, 100mM NaCl, 0.5% Triton X-100, 1mg/ml。(在这个pH范围内比较好发挥作用) 。
综合叙述:无论用哪一种方法破碎组织细胞,都会使细胞内蛋白质或核酸水解酶释放到溶液中,使大分子生物降解,导致天然物质量的减少,加入二异丙基氟磷酸(DFP)可以抑制或减慢自溶作用;加入碘乙酸可以抑制那些活性中心需要有疏基的蛋白水解酶的活性,加入苯化物(PMSF)也能清除蛋白水解酶活力,但不是全部,而且应该在破碎的同时多加几次;另外,还可通过选择pH、温度或离子强度等,使这些条件都要适合于目的物质的提取。
使用前注意事项:
1.根据所处理的样本体积选择适当探头,使用前后均须用酒精棉球擦洗探头,换探头须刚专用扳手更换;
2.AMPLITUDE旋钮打开时,探头不得在空气中暴露,特殊情况下(测试探头)不应超过10秒;
3.使用前准备好冰盒,样品处理时必须置于冰浴中,样品浓度不可过大。