脂肪乳剂是肠外营养的重要组成部分,是能量的补充剂。临床上,脂肪乳剂除了提供机体代谢所需的能量外,还为机体提供生物膜和生物活性物质代谢所需的多不饱和脂肪酸,防止和纠正机体必需脂肪酸的缺乏。目前,临床上常用的脂肪乳剂是长链甘油三酸酯（LCT）脂肪乳剂,基本处方是以大豆油（LCT）为主要成分,用精制卵磷脂作为乳化剂,用甘油作为等渗剂,经高压均质而成。多年的临床应用研究发现,大剂量或长期的连续使用长链脂肪乳剂会引起高脂血症、损害免疫系统和影响网状内皮系统、肝等重要脏器的功能等［１］。德国 B.Braun 公司在对长链脂肪乳剂深入研究的基础上,在 20 世纪 80 年代中期创制了新一代的脂肪乳剂 ―― 中 / 长链脂肪乳注射液（Lipofundin MCT/LCT）。中 / 长链脂肪乳注射液的组方采用机体更易吸收的中链甘油三酸酯（MCT）作为能源,同时保留了部分的 LCT 作为提供必需脂肪酸的来源。该组方充分利用了 MCT 在体内易水解,氧化迅速和代谢过程简单等特点,弥补了 LCT 脂肪乳剂的不足。与 LCT 脂肪乳剂相比,中 / 长链脂肪乳具有更快地提供能量,更好地促进蛋白质合成,良好的肝脏耐受性和维持正常免疫功能的营养效果。在国外,中 / 长链脂肪乳注射液已普遍用于临床营养支持。该产品在 1991 年进入我国市场,其确切的临床营养效果已为国内临床应用研究证实,并被列为国家医疗保险甲类药品。为了加快我国静脉营养事业的发展,配套国内静脉营养的品种,我们成功地开发了中 / 长链脂肪乳注射液。现将制备工艺研究内容,报告如下。

1 处方

11 10% 中 / 长链脂肪乳注射液处方组成注射用大豆油 50 g 、注射用中链甘油三酸酯 50 g 、注射用卵磷脂 12 g 、注射用甘油 25 g 、注射用水加至 1000 mL 。

1.1 处方依据参照国外进口许可中 / 长链脂肪乳注射液的处方。

1.2 各组分在处方中的作用大豆油和中链甘油三酸酯是主要成分,卵磷脂为乳化剂,甘油为等渗调节剂。

2 乳化工艺优化实验

本乳化工艺优化实验方案是在长链脂肪乳注射液制备工艺的基础上,结合中 / 长链脂肪乳注射液的特点,对影响较大的工艺条件采用正交试验法进行筛选,以确定适用的制备工艺。

2.1 实验材料和仪器注射用中链甘油三酸酯（德国 CONDEA 公司） ,注射用大豆油（德国 LiPoid 公司） ,注射用卵磷脂（德国 LiPoid 公司） ,注射用甘油（汕宁氨基酸有限公司）。实验型高压均质机,库尔特微粒分析仪,酸度计,实验用玻璃仪器一套。

2.2 实验方法脂肪乳剂的制备工艺的核心技术是乳化工艺。根据研制和生产长链脂肪乳注射液的经验和中 / 长链脂肪乳注射液中各组分的特点,列出在制备过程中对乳粒粒径和分布可能会造成较大影响的各个因素和水平 , 选用 L9（34）正交表［２］设计实验。以乳粒分布作为判断指标,用库尔特微粒分析仪检测各组实验乳粒的分布。数据处理以 1 μm 以上粒子占 0.5 μm 以上粒子的百分比作指标计算结果［３］。数值小,表示大粒子少,乳粒分布均匀（各因素水平见表 1）。

表 1 因素水平表　（略）

2.3 实验结果见表 2 。

表 2 L9（34）试验计划和实验结果表　（略）

通过计算综合平均值和极差,得出各因素对中 / 长链脂肪乳剂乳化工艺影响的大小顺序为均质压力 →pH 值 → 均质温度。实验结果显示：对乳化工艺影响的主要因素是均质压力,其次是 pH 值和均质温度。在实验条件下*的水平组合为：均质压力 21 MPa , pH 值 8.0 ,均质温度 60 ℃ 。

3 制备工艺

根据上述乳化工艺优化实验的结果确定中 / 长链脂肪乳注射液制备工艺为：称取处方量的大豆油和中链甘油三酸酯于配液锅内,用高速捣碎机混合均匀,加热至 80 ℃ ,加入卵磷脂,高速捣碎至*溶解,使成均匀澄清溶液。另取处方量注射用水加入甘油,置另一配液锅内,在氮气保护的条件下搅拌混合均匀,加热至 60 ℃ 。在高速搅拌下将磷脂油溶液缓缓加入甘油水溶液中,用氢氧化钠调节 pH 值至约 8.0 。经高压均质机反复均质至粒子在 0.33 μm 左右,用 1 μm 微孔滤膜过滤,灌装于输液瓶中,通入氮气,加丁基胶塞,铝盖密封。 115 ℃ 旋转灭菌 25 min ,即得。

4 制备工艺的验证

用上述优化水平组合的制备工艺制备 3 批样品,按中 / 长链脂肪乳注射液质量标准检测,各项指标符合规定。取上述 3 批样品 25 ℃ 留样观察 18 个月,除 pH 值稍有下降外,其余各项指标无明显变化,均符合质量标准的要求,留样观察数据见表 3 。

表 3 25 ℃ 留样观察 18 个月情况　（略）

5 保证产品质量的其他相关措施

质量优良的脂肪乳剂要求乳粒粒径合适,分布均匀,放存期稳定性和临床耐受性好。要达到上述要求,除了对优化实验提及到的工艺条件进行严格的控制外,还应在原辅料的来源和质量控制,防止氧化的工艺措施,灭菌温度和方式的选择以及在制备、贮存期间温度控制等方面给予充分的重视,并有相关的措施加以保证。按照现行工艺条件的要求,均质过程的温度应控制在（60±1） ℃ , pH 值在 7.5 ～ 8.5 之间,并且整个配制过程应在氮气保护条件下进行。为了保证灭菌过程已成形的乳剂不被破坏,应保证整个过程容器受热均匀,因而必须采用旋转灭菌法。同时产品的贮存应置于 25 ℃ 以下阴冷处,避光保存。

6 讨论

61 脂肪乳剂属 O/W 型乳剂,是由两种互不相溶的液相组成的非均相分散系统,在动力学分类上属不稳定体系［４］。中 / 长链脂肪乳注射液由于其处方中含有 5% 的 MCT , MCT 是由含有 6 ～ 12 个碳原子的饱和脂肪酸组成,其分子量小于 LCT ,而水溶性却较 LCT 高 100 倍左右。从 O/W 型乳剂形成原理分析,在乳化剂确定的条件下,油的碳氢链越长,油相亲脂性越强,乳剂的稳定性越好。反之则稳定性相对较差。与长链脂肪乳相比,中 / 长链脂肪乳注射液由于 MCT 的加入使得在整个体系中油相亲脂性相对降低,在均质过程易出现浮油,乳粒分布不均匀等现象,增大了制备难度。中 / 长链脂肪乳注射液制备工艺流程,所用的设备与长链脂肪乳大致相同,但具体的工艺条件中 / 长链脂肪乳注射液更为严格,主要在均质压力、均质温度、 pH 值的控制、灭菌温度和时间等方面。药学研究结果显示：用上述工艺制备的中 / 长链脂肪乳注射液质量可控,贮存期产品稳定。临床研究结果表明：其临床应用是安全的,其有效性与进口许可的中 / 长链脂肪乳注射液相似。

62 要制备质量稳定、临床耐受性好的脂肪乳注射液,除了有严格的制备工艺及可控的质量标准外,原辅料的选择是相当重要的,这是脂肪乳剂研制、生产的先决条件,它关系到临床的用药安全。中 / 长链脂肪乳注射液属生化药品,所用的大豆油、 MCT 、卵磷脂均从植物或动物的有关部位提取,用物理或化学方法精制得到。产地的不同、提取工艺的不同都有可能使得原料组成发生改变,甚至引起理化常数的变化,影响乳化效果。更为严重的是从原辅料中可能带入质量标准无法控制的杂质。这些微量杂质对临床用药安全性的影响已经引起了国外临床营养学家的重视。脂肪乳在临床使用中出现的不良反应如发热、肝功能异常等多是由从原辅料中带入的微量杂质所引起,大剂量、长期使用后果更为严重,所产生的毒副作用甚至是不可逆的。国外报道的狗的亚急性试验已经发现了不同的脂肪乳剂会造成不同的脏器损害,甚至在试验结束前死亡［６］。为考察研制产品的安全性,参照国外*的实验设计方案,进行了 Beagle 狗的亚急性毒性试验,我们用不同厂家的大豆油, MCT 和卵磷脂用同一制备工艺制备的中 / 长链脂肪乳,按 9 g/kg ? d-1（人的 10 倍剂量）剂量连续给药 28 d ,观察狗的亚急性反应及其对其靶器官的影响。结果显示采用不同厂家的大豆油和卵磷脂对狗肝脏的影响有很大的差别,严重者可引起不可逆的肝灶性坏死。动物试验结果提示对脂肪乳生产所需的原辅料除了按相应的质量标准进行控制外,同时应进行狗的亚急性试验,根据实验结果确定原料厂家。通过这一有效的措施,确保临床用药安全。

但脂肪乳注射液比较难以制备,存在的主要问题是物理稳定性与热源不容易达到要求。其中主