Phospha-Light™ SEAP 报告基因检测系统

Phospha-Light™检测系统是一种化学发光报告基因检测,用于灵敏检测用作报告蛋白的分泌型人胎盘碱性磷酸酶。

• 分泌型报告基因检测可在不破坏宝贵细胞的情况下进行分析。
• 碱性磷酸酶检测的宽动态范围使用户可以准确测量从飞克级到纳克级的酶水平。
• 与乙酰转移酶 (CAT) 的同位素⁄非同位素检测或 b-半乳糖苷酶比色⁄荧光检测相比,该检测技术的灵敏度为这两种检测技术的100至1,000倍,其灵敏度高于与其竞争的其他检测技术。
• 具有宽动态范围的高灵敏度检测可检测高水平和低水平的报告基因,而无需对大量样品进行稀释。
• 非放射性报告基因检测试剂盒消除了对使用放射性同位素的顾虑。
•该检测方法能够在大约 1 小时内完成,实现快速检测周转。

随时间监测表达
Phospha-Light™ 检测系统可对细胞培养基中分泌型碱性磷酸酶 (SEAP) 报告蛋白进行灵敏检测。SEAP 基因产物是截短型人胎盘碱性磷酸酶。分泌性报告蛋白不需要制备细胞提取物。可随时间监测细胞群体,使其保持完整以用于进一步实验。

用于超灵敏检测的试剂
Phospha-Light™ 检测系统是优化转染效率的较简单且较快速方法之一。试剂组合是 Phospha-Light™ 检测能实现高灵敏度检测的关键。系统包括 CSPD™ 高性能碱性磷酸酶底物、Emerald™ 化学发光增强剂和专为抑制非胎盘内源性磷酸酶活性而设计的特异性缓冲液系统。化学发光信号的持久性辉光无需进样器即可使用光度计进行测量。

应用
。Phospha-Light™ 报告基因检测系统已广泛用于报告基因检测,以测定已建立的细胞系和转染原代细胞的基因表达,包括作为基因敲低⁄RNA 干扰读数方法。Phospha-Light 报告基因检测用于广泛的病毒功能检测,包括病毒基因表达实验、病毒复制、病毒融合性、病毒中和与病毒介导的细胞-细胞融合及病毒感染性。使用SEAP报告蛋白对报告基因的体内检测非常有用,通过检测转基因、转染或病毒载体感染的动物血清即可。Phospha-Light 报告基因检测系统已用于测量转基因或转染的整体动物血清中 SEAP 水平,包括小鼠、大鼠、狨猴、猴和猪血清以及鸡卵尿囊液。最近,开发了小鼠 SEAP 蛋白 (mSEAP) 以提高转基因小鼠 SEAP 的稳定性,并且 Phospha-Light™ 系统已被用于 mSEAP 的灵敏检测。有关这些和附加参考文献,请参阅文献⁄资源部分中的参考书目。

仅供研究使用。不适用于诊断用途。