Pierce™ 定量肽检测试剂与标准品

• 灵敏— 准确检测低至 5 µg/mL（荧光法）或 25 µg/mL（比色法）的肽混合物
• 可重现— 检测试剂盒的性能已使用肽消化混合物进行严格检测
• 可靠的肽消化标准品— 试剂盒包括一种经验证的肽消化标准品,可提高定量的可重现性
• 兼容— 可与多种试剂配合使用,包括 MS 样品制备试剂和 TMT 标记肽（荧光测定）
• 方便— 简单的混合读取形式,在短短5分钟（荧光法）或15分钟（比色法）内便可读到稳定信号

Pierce 定量比色肽检测试剂盒提供了改良的 BCA 试剂（用于将 Cu+2 还原为 Cu+1）、经优化的专有螯合剂（用于定量肽混合物）以及肽消化参考标准品（用于生成对照线性标准曲线）。这款比色肽检测试剂盒只需少量样品 (20 µL),且工作肽浓度范围为 25–1000 μg/mL。在反应中,先在碱性条件下通过肽的酰胺主链还原铜（双缩脲反应）,随后,还原的铜与螯合物结合形成明亮的红色复合物（吸收波长为 480 nm）,在短短15分钟内便可读取到该复合物。该反应产生的信号比用于肽分析的 Micro-BCA 蛋白检测试剂盒灵敏 3–4 倍。比色肽检测试剂盒与 TMT 标记肽兼容,但不建议用于合成肽,因为该检测试剂盒会受到肽氨基酸含量的影响。

Pierce 定量荧光肽检测试剂盒的试剂包括肽测定缓冲液、荧光肽标记试剂以及用于肽浓度定量测定的肽消化测定标准品。这款灵敏的检测试剂盒仅需 10 µL 样品,会随着肽浓度增加 (5–1000 μg/mL) 而产生线性响应,并且可生成在短短5分钟内便能检测到的稳定最终荧光。在此检测试剂盒中,使用胺反应性荧光试剂（直到与肽反应才会发出荧光）在肽的氨基末端添加了特异性标记。在微孔板读数仪 (ex390/em475) 上检测荧光标记的肽。该检测试剂盒适用于定量测定肽消化混合物和氨基末端未封闭的合成肽。荧光检测试剂盒与 TMT 标记肽不兼容。

Thermo Scientific 肽消化测定标准品旨在用作与 Pierce 定量荧光和比色肽检测试剂配合使用的参考标准品,以提高肽定量的可重现性和准确性。肽消化测定标准品以浓度为 1 mg/mL 的即用型液体规格提供。已使用 MS 级消化参考蛋白,以尽量减少缺失的切割。为确保性能一致,监测蛋白的酶切效率以确保批间一致性,并通过与参比标准品进行比较来评估质量。

应用
• 对样品浓度进行归一化,以便用于下游定量应用
• 对上样量进行归一化,以便用于 LC、MS 和 LC/MS 应用
• 在肽纯化步骤后测量回收率