人白介素2(IL-2)ELISA试剂盒BS-0055 天津本生 人ELISA试剂盒 ELISA检测试剂盒 酶联免疫试剂盒
本生生物公司供应:ELISA试剂盒,动物血清,荧光定量PCR耗材,移液器吸嘴,微量离心管,进口冻存管,细胞培养皿,培养板,培养瓶,进口吸头,仪器及手套,色谱耗材,针头过滤器,分光光度计。
本试剂盒仅供研究使用
检测范围: 96T
使用目的:
本试剂盒用于测定人血清、血浆及相关液体样本中人白介素2(IL-2)含量。
实验原理
本试剂盒应用双抗体夹心法测定标本中白介素2(IL-2)水平。用纯化的白介素2(IL-2)抗体包被微孔板,制成固相抗体,往包被单抗的微孔中依次加入白介素2(IL-2),再与HRP 标记的白介素6(IL-6)抗体结合,形成抗体-抗原-酶标抗体复人白介素2(IL-2)度。
试剂盒组成:
1 30 倍浓缩洗涤液 20ml×1 瓶 !2 酶标试剂 6ml×1 瓶
3 酶标包被板 12 孔×8 条 !4 样品稀释液 6ml×1 瓶
5 显色剂A 液 6ml×1 瓶 !6 显色剂B 液 6ml×1/瓶
7 终止液 6ml×1 瓶!8 标准品(48ng/ml) 0.5ml×1 瓶
9 标准品稀释液 1.5ml×1 瓶!10 说明书 1 份
11 封板膜 2 张!12 密封袋 1 个
标本要求
1.标本采集后尽早进行提取,提取按相关文献进行,提取后应尽快进行实验。若不能马上进行试验,可将标本放于-20℃保存,但应避免反复冻融
2.不能检测含 NaN3 的样品,因 NaN3 抑制可溶性血管内皮细胞蛋白C受体(sEPCR)活性。
操作步骤
1.标准品的稀释:本试剂盒提供原倍标准品一支,用户可按照下列图表在小试管中进行稀释。
60 ng/L5 号标准品150µl 的原倍标准品加入 150µl 标准品稀释液
30 ng/L4 号标准品150µl 的 5 号标准品加入 150µl 标准品稀释液
15 ng/L3 号标准品150µl 的 4 号标准品加入 150µl 标准品稀释液
7.5 ng/L2 号标准品150µl 的 3 号标准品加入 150µl 标准品稀释液
3.75 ng/L1 号标准品150µl 的 2 号标准品加入 150µl 标准品稀释液
2.加样:分别设空白孔(空白对照孔不加样品及酶标试剂,其余各步操作相同)、标准孔、待测样品孔。在酶标包被板上标准品准确加样 50µl,待测样品孔中先加样品稀释液 40µl,然后再加待测样品 10µl(样品终稀释度为 5 倍)。加样将样品加于酶标板孔底部,尽量不触及孔壁,轻轻晃动混匀。
3.温育:用封板膜封板后置 37℃温育 30 分钟。
4.配液:将 30 倍浓缩洗涤液用蒸馏水 30 倍稀释后备用
5.洗涤:小心揭掉封板膜,弃去液体,甩干,每孔加满洗涤液,静置 30 后弃去,如此重复 5 次,拍干。
6.加酶:每孔加入酶标试剂 50µl,空白孔除外。
7.温育:操作同 3。
8.洗涤:操作同 5。
9.显色:每孔先加入显色剂 A50µl,再加入显色剂 B50µl,轻轻震荡混匀,37℃避光显色
15 分钟.
10.终止:每孔加终止液 50µl,终止反应(此时蓝色立转黄色)。
11.测定:以空白空调零,450nm 波长依序测量各孔的吸光度(OD 值)。 测定应在加终止液后 15 分钟以内进行。
人白介素2(IL-2)ELISA试剂盒BS-0055 天津本生
操作程序总结:
计算:
以标准物的浓度为横坐标,OD 值为纵坐标,在坐标纸上绘出标准曲线,根据样品的OD 值由标准曲线查出相应的浓度;再乘以稀释倍数;或用标准物的浓度与 OD 值计算出标准曲线的直线回归方程式,将样品的 OD 值代入方程式,计算出样品浓度,再乘以稀释倍数,
即为样品的实际浓度。
注意事项
1.试剂盒从冷藏环境中取出应在室温平衡 15-30 分钟后方可使用,酶标包被板开封后如未用完,板条应装入密封袋中保存。
2.浓洗涤液可能会有结晶析出,稀释时可在水浴中加温助溶,洗涤时不影响结果。
3.各步加样均应使用加样器,并经常校对其准确性,以避免试验误差。一次加样时间控制在 5 分钟内,如标本数量多,使用排枪加样。
4.请每次测定的同时做标准曲线,做复孔。如标本中待测物质含量过高(样本 OD 值大于标准品孔孔的 OD 值),请先用样品稀释液稀释一定倍数(n 倍)后再测定,计算时请后乘以总稀释倍数(×n×5)。
5.封板膜只限一次性使用,以避免交叉污染。6.底物请避光保存。
7.严格按照说明书的操作进行,试验结果判定必须以酶标仪读数为准.
8.所有样品,洗涤液和各种废弃物都应按传染物处理。
9.本试剂不同批号组分不得混用。
10.如与英文说明书有异,以英文说明书为准。
保存条件及有效期
1.试剂盒保存:;2-8℃。
2.有效期:6 个月