【注意事项】
1．PCR 操作各阶段应严格分区操作,避免交叉污染。
2．试剂盒各组分使用前应充分融化混匀,离心数秒后使用。
3．各组分不得与其他产品或不同批号的相应成分进行互换。
4．待测标本若不及时检测,应保存于-20℃或-70℃。
5．样品的处理应该严格按照生物安全规范操作。
6．PCR 操作人员应具有经验和受过专业培训。
7．本试剂盒仅用于科研使用,不做为临床诊断使用。
商品属性：
产品名称 |
规格 |
货号 |
铜绿假单胞菌检测试剂盒 |
50T |
AP3092 |
【检测方法】
1 ． 试剂准备（试剂准备区）
将试剂盒各组分置4℃避光融化,充分混匀后瞬间离心。计算试剂使用份数 N（N=样本数+1 管阳性对照+1 管阴性对照）,根据下表配置反应体系mix,加入一适当体积离心管中,充分混匀后瞬间离心,按 20μL 分装至 PCR 反应管/板,并转移至样本处理区。
组分 |
体积（μL ） |
qPCR 预混液（含酶） |
16 |
引物探针 |
4 |
总体积（反应体系mix ） |
20 |
2 ． 样本处理（样本处理区）
① 核酸提取
选择合适的盒提取核酸,具体按照相应的试剂盒说明书操作。
② 加样
在已加入反应体系mix 的 PCR 反应管/板上分别加入处理好的待检标本核酸、阴性对照、阳性对照各 5μL,终体积为 25μL。
盖紧管盖或封膜,瞬间低速离心后置荧光PCR 检测仪扩增。
3 ． 扩增检测（核酸扩增区）
步骤 |
温度 |
时间 |
循环数 |
①预变性 |
95℃ |
5min |
1cycle |
②变性 退火/延伸/检测荧光 |
95℃ 55℃ |
10s 40s |
40cycles |
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