黄头杆状病毒PCR检测试剂盒说明书

使用方法:
一、样品 DNA 的制备
用自选方法提取 Cps DNA。注意：DNA 纯化方法是决定检测灵敏度的关键因素。如果不能很好纯化样品 DNA,后面的 PCR 再灵敏也不能提高整体检测灵敏度。
二、制备 Cps 标准曲线（以 10-10E6 这 6 个 10 倍稀释度为例。由于标准品浓度非常高,因此下列稀释操作一定要在独立的区域进行,千万不能污染样品或本试剂盒的其他成分）。为增加产品稳定性和避免扩散传染性病原,本产品不提供活体病毒做阳性对照,只提供没有传染性的、可以直接使用的 DN**段作为阳性对照。
1.标记 6 个离心管,分别为 6,5,4,3,2 和 1 号。
2.用带芯枪头分别加入 45 μL 超纯水（用带芯枪头,下同）。
3.先将本试剂盒提供的阳性对照用 TE 缓冲液或超纯水 10 倍梯度稀释到10E7 拷贝/μL（注：请不要将本试剂盒提供的标准品一次性稀释至 10E7拷贝/μL,建议每次稀释 10 倍,梯度稀释至 10E7 拷贝/μL）。
4.在 6 号管中加入 5 μL 10E7 拷贝/μL 的 Cps 阳性对照(上步稀释所得),充分震荡 1 分钟,得 10E6 拷贝/μL 的阳性对照。
5.换枪头,从 6 号管中取 5 μL 溶液到 5 号管中,充分震荡 1 分钟,得 10E5拷贝/μL 的阳性对照。
6.换枪头,从 5 号管中取 5 μL 溶液到 4 号管中,重复上面的操作直到得到 6个稀释度的阳性对照。
7.NC 管中不加任何阳性对照。
8.从 1-6 号管中分别取 5 μL 和待测样品一起进行定量 PCR（见下步）,每个样品做 3 次重复。PCR 后得到每个阳性对照稀释样品的荧光 PCR Ct 值,并以之为纵轴,以浓度的对数值为横轴,绘制标准曲线。

运输及保存：低温运输,-20℃保存,有效期一年。使用本试剂盒提供的阳性对照时,由于其浓度较高,一定要注意不要污染其他试剂和成分。在专门的区域操作。

产品名称	黄头杆状病毒PCR检测试剂盒说明书
英文名称	YellowHead Baculovirus(YBV)RTPCR
货号	YZP4378

其中引物与模板的正确结合是关键。引物与模板的结合及引物链的延伸是遵循碱基配对原则的。聚合酶合成反应的忠实性及Taq DNA聚合酶耐高温性,使反应中模板与引物的结合(复性)可以在较高的温度下进行,结合的特异性大大增加,被扩增的靶基因片段也就能保持很高的正确度。再通过选择特异性和保守性高的靶基因区,其特异性程度就更高。

(2) 灵敏度高
PCR产物的生成量是以指数方式增加的,能将皮克(pg=10-12g)量级的起始待测模板扩增到微克(ug=10-6g)水平。能从100万个细胞中检出一个靶细胞；在病毒的检测中,PCR的灵敏度可达3个RFU(空斑形成单位)；在细菌学中zui小检出率为3个细菌。
(3) 简便、快速
PCR反应用耐高温的Taq DNA聚合酶,一次性地将反应液加好后,即在DNA扩增液和水浴锅上进行变性-退火-延伸反应,一般在2～4 小时完成扩增反应。扩增产物一般用电泳分析,不一定要用同位素,无放射性污染、易推广。
(4) 对标本的纯度要求低
不需要分离病毒或细菌及培养细胞,DNA 粗制品及总RNA均可作为扩增模板。可直接用临床标本如血液、体腔液、洗嗽液、毛发、细胞、活PCR技术概论。
注意事项：
①加入试剂的顺序应一致,以保证所有反应板孔温育的时间一样。
②使用干净的塑料容器配置洗涤液。
③按照鸡血红蛋白(HB)ELISA检测试剂盒说明书中标明的时间、加液的量及顺序进行温育操作。
④底物A应挥发,避免长时间打开盖子。底物B对光敏感,避免长时间暴露于光下。避免用手接触,有毒。实验完成后应立即读取OD值。
⑤洗涤酶标板时应充分拍干,不要将吸水纸直接放入酶标反应孔中吸水。
⑥使用一次性的吸头以免交叉污染,吸取终止液和底物A、B液时,避免使用带金属部分的加样器。
⑦实验中不用的板条应立即放回包装袋中,密封保存,以免变质。
⑧试剂应按标签说明书储存,使用前恢复到室温。稀稀过后的标准品应丢弃,不可保存。
⑨不用的其它试剂应包装好或盖好。不同批号的试剂不要混用。保质前使用。

以下是黄头杆状病毒PCR检测试剂盒说明书的相关产品：

* Sclerostin / SOST 抗體, 兔多抗, 抗原親和純化 ELISA    50 µg

* CD116 / GM-CSFR 抗體 (FITC), 兔單抗 FCM    25 Test

* Cathepsin B 抗體, 兔多抗, 抗原親和純化 WB   IHC   IP    50 µg

* RELT / TNFRSF19L 抗體, 兔多抗, 抗原親和純化 ELISA    50 µg

* CD113 / Nectin-3 / PVRL3 抗體, 鼠單抗 ELISA    50 µg

* CEACAM6 / CD66c 抗體, 兔多抗, 抗原親和純化 ELISA    50 µg

* TIMP-1 / TIMP1 抗體, 鼠單抗 ELISA    50 µg

* IFNB1 / IFN-beta / Interferon beta 抗體, 鼠單抗 ELISA    50 µL

* CEACAM6 / CD66c 抗體 (PE), 鼠單抗 FCM    25 Test

* G-CSFR / CD114 / CSF3R 抗體, 鼠單抗 ELISA    50 µg

黄头杆状病毒PCR检测试剂盒说明书恩曲他滨 CAS  规格： 100mg 订购|咨询

人参皂苷Rh1 CAS 63223-86-9 规格： 20mg 订购|咨询

丙镁 CAS  规格： 50mg 订购|咨询

榧子 CAS  规格： 3g 订购|咨询

豆腐果苷 CAS 80154-34-3 规格： 20mg 订购|咨询

胡薄荷 CAS 89-80-5 规格： 20mg 订购|咨询

川芎嗪 CAS 1124-11-4 规格： HPLC≥98%;20mg 订购|咨询

左旋多巴 CAS 59-92-7 规格： 20mg 订购|咨询

当归酸酐 CAS 94487-74-8 规格： HPLC≥98%;20mg 订购|咨询

白色念珠菌 CAS  规格： 冻干粉 订购|咨询

胞 CAS 71-30-7 规格： HPLC≥98%;50mg 订购|咨询