嗜吞噬细胞无浆体PCR检测试剂盒说明书

使用方法:
一、样品 DNA 的制备
用自选方法提取 Cps DNA。注意：DNA 纯化方法是决定检测灵敏度的关键因素。如果不能很好纯化样品 DNA,后面的 PCR 再灵敏也不能提高整体检测灵敏度。
二、制备 Cps 标准曲线（以 10-10E6 这 6 个 10 倍稀释度为例。由于标准品浓度非常高,因此下列稀释操作一定要在独立的区域进行,千万不能污染样品或本试剂盒的其他成分）。为增加产品稳定性和避免扩散传染性病原,本产品不提供活体病毒做阳性对照,只提供没有传染性的、可以直接使用的 DN**段作为阳性对照。
1.标记 6 个离心管,分别为 6,5,4,3,2 和 1 号。
2.用带芯枪头分别加入 45 μL 超纯水（用带芯枪头,下同）。
3.先将本试剂盒提供的阳性对照用 TE 缓冲液或超纯水 10 倍梯度稀释到10E7 拷贝/μL（注：请不要将本试剂盒提供的标准品一次性稀释至 10E7拷贝/μL,建议每次稀释 10 倍,梯度稀释至 10E7 拷贝/μL）。
4.在 6 号管中加入 5 μL 10E7 拷贝/μL 的 Cps 阳性对照(上步稀释所得),充分震荡 1 分钟,得 10E6 拷贝/μL 的阳性对照。
5.换枪头,从 6 号管中取 5 μL 溶液到 5 号管中,充分震荡 1 分钟,得 10E5拷贝/μL 的阳性对照。
6.换枪头,从 5 号管中取 5 μL 溶液到 4 号管中,重复上面的操作直到得到 6个稀释度的阳性对照。
7.NC 管中不加任何阳性对照。
8.从 1-6 号管中分别取 5 μL 和待测样品一起进行定量 PCR（见下步）,每个样品做 3 次重复。PCR 后得到每个阳性对照稀释样品的荧光 PCR Ct 值,并以之为纵轴,以浓度的对数值为横轴,绘制标准曲线。

运输及保存：低温运输,-20℃保存,有效期一年。使用本试剂盒提供的阳性对照时,由于其浓度较高,一定要注意不要污染其他试剂和成分。在专门的区域操作。

产品名称	嗜吞噬细胞无浆体PCR检测试剂盒说明书
英文名称	Anaplasma phagocytophilumPCR
货号	YZP3258

其中引物与模板的正确结合是关键。引物与模板的结合及引物链的延伸是遵循碱基配对原则的。聚合酶合成反应的忠实性及Taq DNA聚合酶耐高温性,使反应中模板与引物的结合(复性)可以在较高的温度下进行,结合的特异性大大增加,被扩增的靶基因片段也就能保持很高的正确度。再通过选择特异性和保守性高的靶基因区,其特异性程度就更高。

(2) 灵敏度高
PCR产物的生成量是以指数方式增加的,能将皮克(pg=10-12g)量级的起始待测模板扩增到微克(ug=10-6g)水平。能从100万个细胞中检出一个靶细胞；在病毒的检测中,PCR的灵敏度可达3个RFU(空斑形成单位)；在细菌学中zui小检出率为3个细菌。
(3) 简便、快速
PCR反应用耐高温的Taq DNA聚合酶,一次性地将反应液加好后,即在DNA扩增液和水浴锅上进行变性-退火-延伸反应,一般在2～4 小时完成扩增反应。扩增产物一般用电泳分析,不一定要用同位素,无放射性污染、易推广。
(4) 对标本的纯度要求低
不需要分离病毒或细菌及培养细胞,DNA 粗制品及总RNA均可作为扩增模板。可直接用临床标本如血液、体腔液、洗嗽液、毛发、细胞、活PCR技术概论。
注意事项：
①加入试剂的顺序应一致,以保证所有反应板孔温育的时间一样。
②使用干净的塑料容器配置洗涤液。
③按照鸡血红蛋白(HB)ELISA检测试剂盒说明书中标明的时间、加液的量及顺序进行温育操作。
④底物A应挥发,避免长时间打开盖子。底物B对光敏感,避免长时间暴露于光下。避免用手接触,有毒。实验完成后应立即读取OD值。
⑤洗涤酶标板时应充分拍干,不要将吸水纸直接放入酶标反应孔中吸水。
⑥使用一次性的吸头以免交叉污染,吸取终止液和底物A、B液时,避免使用带金属部分的加样器。
⑦实验中不用的板条应立即放回包装袋中,密封保存,以免变质。
⑧试剂应按标签说明书储存,使用前恢复到室温。稀稀过后的标准品应丢弃,不可保存。
⑨不用的其它试剂应包装好或盖好。不同批号的试剂不要混用。保质前使用。
以下是嗜吞噬细胞无浆体PCR检测试剂盒说明书的相关产品：

白土苓（华南肖菝葜） 英文名称：Clay Ling (Southern China Heterosmilax) 规格：：10g 保存：：-20℃,避光

黄精 英文名称：Huang Jing 规格：：2g 保存：：-20℃,避光

山楂叶(山里红) 英文名称：Hawthorn leaves (Shan Lihong) 规格：：3g 保存：：-20℃,避光

黑芝麻 英文名称：Black sesame 规格：：1g 保存：：-20℃,避光

草乌 英文名称：Kusnezoff Monkshood Root 规格：：0.6g 保存：：-20℃,避光

珊瑚姜 英文名称：Coral ginger 规格：：0.5g 保存：：-20℃,避光

胆木 英文名称：Bravery wood 规格：：5g 保存：：-20℃,避光

鹧鸪菜 英文名称：Tanaka 规格：：1g 保存：：-20℃,避光

广枣 英文名称：Fructus Choerospondiatis 规格：：1g 保存：：-20℃,避光

塞隆骨 英文名称：Theron bone 规格：：2g 保存：：-20℃,避光

狼毒(狼毒大戟) 英文名称：Stellera chamaejasme (Euphorbiaceae) 规格：：4g 保存：：-20℃,避光

八角枫 英文名称：Alangium 规格：：5g 保存：：-20℃,避光

牛黄 英文名称：Bezoar 规格：：10mg 保存：：-20℃,避光

金铁锁 英文名称：Psammosilene tunicoides 规格：：1g 保存：：-20℃,避光

嗜吞噬细胞无浆体PCR检测试剂盒说明书鲸雌二醇(E2)ELISA Kit  Whale Estradiol,E2 ELISA kit

大鼠Ⅰ型前胶原(PCⅠ)ELISA Kit  Rat typeⅠ procollagen,PC I ELISA Kit

兔子α2抗纤溶酶(α2-AP)ELISA Kit  Rabbit α2-Antiplasmin,α2-AP ELISA Kit

人弓蛔虫(Tc)抗体(IgG)ELISA Kit  Human Tc IgG ELISA kit

人真核细胞延伸因子2(eEF2)ELISA Kit  Human elongation factor 2,eEF2 ELISA Kit

小鼠肿瘤坏死因子受体超家族成员11A(TNFRSF11A/RANK)ELISA Kit  Mouse Tumor necrosis factor receptor superfamily member 11A,TNFRSF11A ELISA kit

人血管生成素样蛋白4(ANGPTL4)ELISA Kit  Human ANGPTL4 ELISA kit

人P2蛋白抗体(IgG)ELISA Kit  Human myelin protein two antibody IgG ELISA Kit

人Apelin ELISA Kit  Human Apelin ELISA kit

人膜内氨酰氨基肽酶(ANPEP)ELISA Kit  Humna ANPEP ELISA Kit

人免疫球蛋白G Fc段受体Ⅰ(FcγRⅠ/CD64)ELISA Kit  Human Receptor Ⅰ for the Fc region of immunoglobulin G,FcγRⅠ ELISA Kit

牛转录因子P65(RELA)ELISA Kit  Bovine transcription factor p65,RELA ELISA kit

大鼠D-乳酸ELISA Kit  Rat D-lactic acid ELISA Kit

绵羊免疫球蛋白M(IgM)ELISA Kit  Sheep Immunoglobulin M,IgM ELISA Kit