胶体金免疫层析法检测呋喃妥因检测试剂盒
胶体金免疫层析法检测呋喃妥因检测试剂盒
1 原理及用途
本产品应用竞争抑制胶体金免疫层析的原理制成,用于检测蜂蜜、组织、肝脏等样本中的呋喃妥因代谢物(AHD)。
样本溶液滴入检测卡的加样孔后,样本溶液中的呋喃妥因代谢物与金标抗体相结合,从而阻止金标抗体与纤维素膜上呋喃妥因偶联物结合。当样本溶液中的呋喃妥因代谢物含量大于检测*检测线不显色,结果为阳性;当样本溶液中呋喃妥因代谢物含量小于检测*检测线显紫红色,结果为阴性。
2技术指标
2.1试剂卡灵敏度:1ppb(ng/ml)
对样本的zui终检测限须以试剂卡灵敏度乘以样本处理的稀释比例。
2.2样本检测下限:
蜂蜜、组织、肠衣、肝脏………………………0.5ppb
3试剂盒组成
检测卡……………………50个/盒
样本复溶液……………………1瓶
衍生化试剂……………………3瓶
说明书…………………………1份
4需要的器材和试剂
4.1仪器:均质器 、氮气吹干装置、振荡器、离心机、刻度移液管、天平(感量0.01g)
4.2微量移液器:单道20µl-200µl,100µl-1000µl
4.3试剂:乙酸乙酯、正己烷、氢氧化钠、浓HCl、K2HPO4·3H2O
5样本前处理
5.1样本处理前须知:
实验器具必须洁净并使用一次性吸头,以避免污染干扰实验结果。
5.2配液:
配液1:0.5M K2HPO4溶液
称11.4g K2HPO4▪3H2O加去离子水溶解定溶至100ml。
配液2:1M HCL
8.6mL浓HCL加去离子水定容至100mL。
配液3:1M NaOH溶液
称取4g NaOH,加去离子水定容至100ml
5.3蜂蜜、组织、肠衣、肝脏样本处理方法
1)称取2±0.05g均质样本于离心管中,加入4ml去离子水、0.5 ml 1M 盐酸溶液和600μl衍生化试剂,振荡5分钟;
2)65℃水浴孵育30分钟;
3)分别加入1ml 0.5M K2HPO4 溶液,0.4ml 1M NaOH溶液和5ml的乙酸乙酯,振荡5分钟;
4)室温下4000转/分,离心5分钟;
5)取出2.5ml的上层液到另一个离心管中,50-60℃氮气或空气吹干;
6)用1ml正已烷溶解残留物,加入0.5ml复溶液充分振荡混合30秒;室温4000转/分,离心5分钟;
7)上层为正已烷,取下层样本液用于分析。
浓缩倍数为:2检测下限:0.5ppb
6实验步骤
6.1撕开检测卡铝箔包装袋,取出检测卡,放于平整、洁净的台面上。
6.2用配套吸管吸取已准备好的样本液体,缓慢、逐滴的(应避免泡沫产生)滴加2-3滴(约60ul)到加样孔(S)内。
6.3室温下放置8-10分钟判断结果。超过10分钟的结果只能作为参考。
7结果判断
阴性(-):C线、T线均显红色,表示样本中呋喃妥因浓度低于检测下限,或不含有。
阳性(+):C线显红色,T线不显色,则表示样本中呋喃妥因浓度高于检测下限。
无效:未出现质控C线,表明操作过程不正确或检测卡已失效。